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MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒

MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒

分类:

细胞产品 - 细胞毒性试剂盒

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AR1156

200元/500次  

细胞相关实验

检测试剂盒

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Product Brief

  • 产品概况

    产品货号AR1156
    产品名称MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒
    价格规格¥200/500次
    保存条件MTT染色液,-20℃避光保存;Formazan溶解液可以室温保存。
    内容MTT染色液 5ml
    Formazan溶解液 55ml
    产品简介1.MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒(MTT Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit)被广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的实验方法。由于细胞活力与细胞数呈正相关,因此常常用来检测细胞的增殖情况。MTT可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成结晶状的深紫色产物formazan。在特定溶剂存在的情况下,可以被完全溶解。然后通过酶标仪可以测定570nm波长附近的吸光度。细胞增殖越多越快,则吸光度越高;细胞毒性越大,则吸光度越低。
    2.本试剂盒采用了独特的Formazan溶解液配方,无需去除原有的培养液,可以直接加入Formazan溶解液溶解formazan。从而避免了由于去除培养液时formazan被部分去除而引起的误差。
    3.本试剂盒背景低,灵敏度高,线性范围宽,使用方便提高了可靠性。
    4.本产品为500 次(5个96孔细胞培养板)操作。
    注意事项:1. 由于使用96孔板进行检测,如果你的细胞要养48 小时或更长,建议不要吝啬96-孔板的四周边孔,这32个边孔不能使用,建议加入灭菌PBS以饱和中间64个孔的水分。因为细胞培养过程中,边孔的水分蒸发很快,培养液及里面的药物会出现浓缩现象,细胞的状况就复杂了。
    2. MTT溶剂在低温情况下会凝固,使用前请室温放置或20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。
    3. MTT一般最好4ºC避光保存两周内有效,保存在-20度长期保存,避免反复冻融,最好小剂量分装,用避光袋或是黑纸、锡箔纸包住避光以免分解,当MTT变为灰绿色时就表明MTT已失效。
    4. Formazan溶解液结冻或产生沉淀时可以37℃水浴孵育以促进溶解,并且必须在全部溶解并混匀后使用。
    5. 孵育时,须避光。
    6. MTT有致癌性,用的时候小心,有条件最好带那种透明的簿膜手套. MTT需要无菌,MTT对菌很敏感。


Instructions

1. 收集对数期细胞,调整细胞悬液浓度,每孔加入100ul,细胞增殖实验每孔加入2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入5000个细胞(96孔板,具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。加入浓度梯度的药物,原则上,细胞贴壁后即可加药,每孔0-10ul,设3-5个复孔。
2. 5%CO2,37℃孵育16-48小时,置显微镜下观察。
3. 每孔加入10微升MTT染色液,继续培养4h。若药物与MTT能够反应,可先离心后弃去培养液,小心用PBS洗2-3遍后,再加入含MTT的培养液。
4. 每孔加入100微升Formanzan溶解液,在细胞培养箱内再继续孵育。直至在普通光学显微镜下观察发现formazan全部溶解。通常37℃孵育4小时左右,紫色结晶会全部溶解。如果紫色结晶较小较少,溶解的时间会短一些。如果紫色结晶较大较多,溶解的时间会长一些。(也可以每孔加入50ul的DMSO,细胞培养箱孵育10min,紫色结晶基本全部溶解,加入DMSO之前需去除细胞培养液。)
5. 在酶联免疫检测仪570nm测定吸光度。如无570nm滤光片,可以使用560-600nm的滤光片。

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