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Commassie改良增强型蛋白质定量试剂(G250)

蛋白定量试剂盒

分类:

免疫印迹检测系统 - 蛋白定量

说明书:

AR0145

90元/Kit

WB

WB辅助试剂

现货

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Product Brief

  • 产品概况

    产品货号AR0145
    产品名称考马斯亮蓝增强型蛋白质定量试剂
    价格规格¥90/Kit
    保存条件4℃保存,一年有效。
    产品说明考马斯亮蓝在酸性游离状态下呈棕红色,最大光吸收在465nm,当它与蛋白质结合后变为蓝色,最大光吸收在595nm。在一定的浓度范围内,蛋白质-染料复合物在波长为595nm处的光吸收与蛋白质含量成正比,通过测定595nm处光吸收的增加量可知与其结合蛋白质的量。蛋白质和Commassie结合,在2-5min左右的时间内达到平衡,完成反应十分迅速,其结合物在室温下1小时内保持稳定,灵敏度比Lowry法还高4倍。可测微克级蛋白质含量,测定蛋白质浓度范围为25~1500μg/ml。
    注意事项1. 各取样操作应准确无误。
    2. 在50~1000μg/ml的浓度范围线性最佳。
    3. 加入样品后的试剂,混合均匀后,静置反应,测量过程中切不要再次剧烈晃动。
    4. 为了测试准确,请在试剂加入后的5~20min内测定光吸收,因为在这段时间内颜色是最稳定的。
    5. 有些阳离子,如K+、Na+、Mg2+、(NH4)2SO4、乙醇等物质不干扰测定,但大量的去污剂如TritonX-100、SDS等严重干扰测定。


Instructions

标准品的制备:根据下表.制备一套蛋白质标准品,推荐使用PBS或0.9%Nacl进行稀释。

一:试管测定法(检测范围=25~1500 μg/ml)
1. 各取50ul的标准品和未知样品至相应标记的测试管中。
2. 滴加1.5ml考马斯增强型试剂(溶液 A)至每管中并充分混匀。
3. 可选参考: 对于大多数情况,在室温下孵育样品10分钟。
4. 设置分光光度计值于595nm并将仪器调零。然后检测所有样品的吸收值。
5. 将所有标准品及未知样品的数值中减去595nm下零孔所对应的平均值。
6. 绘制标准曲线:通过零孔平均值校正每个BSA标准品在其相应浓度下所对应的数值。再用此标准曲线判断得出每个未知样品的蛋白浓度。二:微孔板测定法(检测范围=25~1500 μg/ml)
1. 各取10μl的标准品和未知样品至相应标记的微孔板中。
2. 滴加200 μl考马斯增强型试剂(溶液 A)至每孔混匀并充分震荡30秒。
3. 停止震荡。对于大多数情况,在室温下孵育样品10分钟。
4. 在读数仪器中测量595nm时的吸光值。
5. 将所有标准品及未知样品的数值中减去595nm下零孔所对应的平均值。
6. 绘制标准曲线:通过零孔平均值校正每个BSA标准品在其相应浓度下所对应的数值。再用此标准曲线判断得出每个未知样品的蛋白浓度。

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