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红细胞裂解液

细胞裂解液

分类:

免疫印迹检测系统 - 蛋白抽提

说明书:

AR1118

60元/100ml  

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Product Brief

  • 产品概况

    产品货号AR1118
    产品名称红细胞裂解液
    价格规格¥60/100ml
    保存条件4℃保存,一年有效
    产品说明博士德生产的红细胞裂解液,为10X红细胞裂解液,经过优化配方,用于从人或鼠等的血液或组织样品中裂解并去除无细胞核红细胞的溶液。此溶液中主要有效成分为氯化铵。使在裂解红细胞的同时几乎不损伤淋巴细胞或其它有细胞核的细胞。本裂解液经过无菌过滤,处理过的血液或组织细胞样品可以用于后续的原代培养、细胞融合以及核酸或蛋白的提取及各种常规的分析和检测。
    注意事项对于微量或少量的血液样品,可以在第一步中不进行离心弃上清的操作,直接在第二步中加入10倍血液体积的红细胞裂解液,并在冰上裂解4-5分钟。对于鼠的血液,裂解4-5分钟已经足够,对于人的外周血,宜延长裂解时间至10分钟,但通常不宜超过15分钟,并且裂解过程中宜适当偶尔摇动以促进红细胞裂解。后续步骤相同。


Instructions

此红细胞裂解液为10X溶液,使用时必须用去离子水稀释至1X工作液。
对于组织细胞样品:
1. 新鲜组织经过消化处理,通过适当方法分散成细胞悬液。
2. 4℃ 400-500g离心弃上清取沉淀。
3. 用去离子水将10X的红细胞裂解液稀释成1X的工作液,加入3-5倍细胞体积的1X的红细胞裂解液,轻轻吹打混匀,在冰上裂解4-5分钟,并且裂解过程中宜适当偶尔摇动以促进红细胞裂解。例如细胞沉淀的体积为1ml,则加入3-5ml的红细胞裂解液。
4. 4℃400-500g离心5分钟,弃红色上清。
5. 如果发现红细胞裂解不完全,可以重复上述步骤3和步骤4一次。通常极微量的红细胞不会影响后续的一些检测。
6. 加入适量PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液,重悬沉淀洗涤1-2次,4℃ 400-500g离心2-3分钟,弃上清。洗涤液的用量通常应至少为细胞沉淀体积的5倍。
7. 根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀后即可进行细胞计数,调节密度,进行下一步染色。
对于血液样品:
1. 取新鲜抗凝血,4℃400-500g离心5分钟,离心弃上清。
2. 用去离子水将10X的红细胞裂解液稀释成1X的工作液,加入10倍细胞体积的1X的红细胞裂解液,轻轻吹打混匀,在冰上裂解4-5分钟,并且裂解过程中宜适当偶尔摇动以促进红细胞裂解。例如细胞沉淀的体积为1ml,则加入10ml的红细胞裂解液。
3. 4℃400-500g离心5分钟,弃红色上清。
4. 如果发现红细胞裂解不完全,可以重复上述步骤2和步骤3一次。通常极微量的红细胞不会影响后续的一些检测。
5. 加入适量PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液,重悬沉淀洗涤1-2次,4℃400-500g离心2-3分钟,弃上清。洗涤液的用量通常应至少为细胞沉淀体积的5倍。
6. 根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀后即可进行细胞计数,调节密度,进行下一步染色。

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